用顯微鏡進行花粉活力的測定

用顯微鏡進行花粉活力的測定用顯微鏡進行花粉活力的測定實驗類型：基礎內容：一、實驗目的1.學習用碘-碘化鉀染色測定法測定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態、生理特徵。2.學習用過氧化物酶測定法測定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態、生理特徵。3.學習用氯...

內容：

1.學習用碘-碘化鉀染色測定法測定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態、生理特徵。

2.學習用過氧化物酶測定法測定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態、生理特徵。

3.學習用氯化三苯基四氮唑法測定花粉活力，了解可育和不育花粉的形態、生理特徵。

（一）碘一碘化鉀染色測定法

水稻正常花粉呈圓球形，並積累澱粉較多，通常可用I-KI染成藍色；發育不良的花粉常呈畸形，不積累澱粉，用I-KI染色，不呈藍色，而呈黃褐色。

具有生活力的花粉含有活躍的過氧化物酶。此酶能利用過氧化氫使各種多酚及芳香族胺發生氧化而產生顏色，依據顏色可知花粉有無活性。

（三）氯化三苯基四氮唑法(TTC法)

2、3、5-氯化三苯基四氮唑(TTC)的氧化狀態是無色的，被氫還原時成紅色的TTF。

具有生命力的種子，由於呼吸作用產生的氫能使TTC還原成TTF，因此胚部便染成紅色；而無生命的種子沒有呼吸代謝活力，TTC不被還原，因而胚部不著色。所以，可根據種子胚部染不染成紅色來判斷種子有無生命力，從而測定種子發芽率。

2. 試劑:

(1)I-KI溶液

(2) 0.5％聯苯胺：將0.5g聯苯胺溶於100m150％乙醇中。

(3)0.5％a一萘酚：將0.5ga一萘酚溶於100ml 50％乙醇中。

(4)0.25％碳酸鈉：將0.25g碳酸鈉溶於100ml水中。

(5)0.3％過氧化氫，即試劑Ⅱ。

(6)試劑I：由0.5％聯苯胺、0.5％a一萘酚和0.25％碳酸鈉溶液各10ml混合配成。

(7)0.5％TTC溶液。

3.器材：、載玻片、蓋玻片、鑷子、恆溫箱。

1.花粉採集、置載玻片上、滴加試劑

3.計算

1、四氮唑液最好現配現用，如要貯存必須放在棕色瓶中，並放在陰涼黑暗處。

2、花粉採集時期要適宜，取充分成熟將要開花的花朵帶回室內，取其內部的花粉。

六、思考題

1.用3種方法統計不同植物的花粉活力百分率。

2.試比較用3種方法測定的同一花粉的活力百分率是否相同，分析其原因。